(1). 收集血样本, 将其与Na2EDTA(终浓度1mg/ml)在干试管内混合。或者直接用含Na2EDTA的空针抽血。

      (2). 血样本以1500g 4℃下离心10分钟, 移出上清血浆。

      (3). 在给定的血样本体积中加入等体积的(b)溶液(见表6-4, 密度1.117g/ml)以形成终密度为1.063g/ml的溶液。由于不同次操作可能造成的误差, 需仔细测定溶液的密度, 必要时要调节密度至1.063g/ml。

      (4). 将配制好的血浆放入超速离心管, 盖好盖子。加入每管中的血浆应有所限量, 以防开盖时破坏上层。但离心管中血浆也不能太少, 否则在离心力作用下管子会内陷。假如是用Beckman制备性超速离心管(16X76mm), 其内应放入10.4ml血浆。假如最后一支配制的试管内血浆体积不足10.4ml, 应加入(a)溶液(密度1.063g/ml)以补足体积。

      (5). 检查每管是否平衡, 如有必要, 在平衡管中加入(a)溶液使其达到平衡。

      (6). 用固角转子(Beckman 40或50 Ti型)以40000 r.p.m(105400g)16℃下离心18hr, 在不用制动闸的情况下让转子缓慢停止。

      (7). 从转子中小心取出离心管, 一次只取一支, 揭开盖子, 收集含VLDL和LDL的上部分液体, 即微红色的HDL层和管底血浆蛋白层之上的一半清亮液体。采用移样器或Beckman管切机。后者应确定管切的位置, 应在距管顶端3-4cm处切割。