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HDL2和HDL3分离与测定
来源:中国血脂网 编辑:FC   发布时间:2008-4-17 14:21:10

      一、制备性超速离心法

      采用的方法与上述方案1介绍的方法相同。只是增加一个密度为1.125g/ml的步骤。此方法的优点在于能得到较纯的HDL2和HDL3, 并可用于进一步的分离亚类。对于高甘油三酯血症病人, 该法比沉淀法能提供更可靠的结果。

───────────────────────────

      方案2: 浮选超速离心法分离HDL2和HDL3

      (1). 按方案1中的1-8步进行。

      (2). 在收集的下层液中加入等积的溶液(密度1.187; 见表6-4), 使其终密度的1.125g/ml。

      (3). 以40000 rmp在16℃下离心40hr。

      (4). 取出2ml含HDL2的上层液。

      (5). 在下层液中加入等体积的溶液(密度为1.295g/ml). 使其终密度为1.21g/ml。    (6). 以40 000 r.p.m在16℃下离心40hr。   

      (7). 收集2ml含HDL3的上层液。

───────────────────────────

      二、沉淀法

      由于Gidez-Eder法的简单易行, 已被广泛用于测定血浆HDL2和HDL2浓度的临床研究。该方法的理论依据是含Apo B的脂蛋白可用肝素-MnCl2从血浆中沉淀下来, 而总HDL和其他血浆白蛋白被残留在上层清溶液中。再加入硫酸右旋糖酐使HDL2成份从溶液中沉淀下来, 而HDL3成份则仍残留在上层清溶液中。

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