
一、制备性超速离心法
采用的方法与上述方案1介绍的方法相同。只是增加一个密度为1.125g/ml的步骤。此方法的优点在于能得到较纯的HDL2和HDL3, 并可用于进一步的分离亚类。对于高甘油三酯血症病人, 该法比沉淀法能提供更可靠的结果。
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方案2: 浮选超速离心法分离HDL2和HDL3
(1). 按方案1中的1-8步进行。
(2). 在收集的下层液中加入等积的溶液(密度1.187; 见表6-4), 使其终密度的1.125g/ml。
(3). 以40000 rmp在16℃下离心40hr。
(4). 取出2ml含HDL2的上层液。
(5). 在下层液中加入等体积的溶液(密度为1.295g/ml). 使其终密度为1.21g/ml。 (6). 以40 000 r.p.m在16℃下离心40hr。
(7). 收集2ml含HDL3的上层液。
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二、沉淀法
由于Gidez-Eder法的简单易行, 已被广泛用于测定血浆HDL2和HDL2浓度的临床研究。该方法的理论依据是含Apo B的脂蛋白可用肝素-MnCl2从血浆中沉淀下来, 而总HDL和其他血浆白蛋白被残留在上层清溶液中。再加入硫酸右旋糖酐使HDL2成份从溶液中沉淀下来, 而HDL3成份则仍残留在上层清溶液中。 |