已有许多方法能将血浆脂蛋白分离成多种不同的种类。临床实验室中常用的技术有沉淀法、电泳法和超速离心法。

一、沉淀法

    由于载脂蛋白(Apo)B与一系列沉淀因子之间有特殊作用, 通过沉淀法能将含Apo B的脂蛋白与不含Apo B的脂蛋白分离。因此极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)能与HDL分离。有数种沉淀法可供选用, 但两种方法最为常用, 即肝素/锰法和镁/磷钨酸法。

    (一)、 样本准备

    沉淀法多采用血清样本。如果使用血浆样本, 且采用肝素/锰沉淀法分析时, 则锰的用量需要增加一倍。这可造成上清液中锰的含量过高,继而影响该上清液中胆固醇的酶法测定。对于血浆甘油三酯(TG)浓度大于4.5mmol/L(400mg/dl)的样本, 在采用沉淀法(特别是采用肝素/锰法)分析前, 必须进行预处理, 以清除VLDL和糜乳微粒。若不进行预处理将会导致不完全沉淀, 造成HDL-C测定不准确。可采用超速离心(以100000g速度离心18小时)或超滤法加以清除。一般不主张采用稀释样本的做法。

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方案1. 用镁/磷钨酸沉淀法进行HDL-C定量测定

试剂: (a) 0.5M二氯化镁(MgCl2)