超速离心过程中, 为防止脂蛋白发生变性, 样本应按电泳方法节所介绍的一些技术进行处理。可在新鲜血浆样本中加入EDTA(0.04%终未浓度)、偶氮化钠(NaN2 0.05%)和苯甲基氟磺酰(PMSF 0.015%)防止脂蛋白变性。

    (一)、用固定角头序贯漂浮超速离心分离脂蛋白

    这种方法对于制备实验所用或进行成份分析时的脂蛋白样本很有价值。脂蛋白的回收率可能较低, 因此要求操作者有熟练的技术以保证脂蛋白浓度结果精确性。

    离心转头和离心时间的选择

    用于脂蛋白分离的离心机有多种, 具体选择主要取决于超速离心的类型和分析样本的数量和体积。固定角头能将脂蛋白运行的路线缩短到最小程度。60Ti和42.1Ti Beckman转头是采用此项原理的实例。临床上测定脂蛋白浓度的常用方法在方案3和方案4中描述。方案3介绍实验研究采用的脂蛋白分离方法, 方案4和方案5介绍临床运用的脂蛋白浓度测定方法。

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   方案3: VLDL, IDL, LDL和HDL分离的方法

    (1). 按样本制备的要求(见前述)处理250ml血浆。

    (2). 将血浆分置于聚碳酸酯厚壁离心管(38.5ml), 然后盖上, 用0.5M NaCl平衡。