(3). 在10-15℃下以30000r.p.m(100000g) 转速离心20小时。乳糜微粒和VLDL浮于离心管上层, 而其他血浆蛋白和脂蛋白沉于管底并形成含脂蛋白和其他蛋白的沉块。如需将乳糜微粒单独清除, 在20小时连续离心前将血浆以20000r.p.m 转速离心30分钟即可。

    (4). 用巴斯德(Pasteur)吸管将VLDL层和其部分透明的非脂蛋白层吸出。假如需要高纯度的VLDL, 可将收集的上层清液在相同条件下再次离心。如要确保无VLDL或乳糜微粒混杂, 也可将下层液再次离心一次。应注意在重复超速离心时某些脂蛋白成份(特别是Apo CIII)可能会丢失。

    (5). 将下层液中的小沉块搅散并混匀, 测定其溶量。

    (6). 通过以下两种方法可提高下层液中的密度。

    a. 加固态KBr: 此法的优点是只使超速离心的样本体积轻微增加。但并不十分完美。考虑到原子体积与浓度和温度相关, 故KBr的量必须根据具体情况计算。

    b. 另一种目前较常用的方法是在样本中加入"重液"。 将153 g NaCl、354g KBr和100ug EDTA溶于1升水中配成密度为1.33g/ml的溶液即为"重液"。因其中有些溶质在贮存中易于结晶, 所以这种溶液要定期在10-15℃条件下仔细校对其密度。