(三)、密度梯度超速离心

    近年来, 用甩平头(水平式转头)进行密度梯度超速离心以分离脂蛋白的方法越来越普及。分离脂蛋白时, 此法与序贯超速离心比较, 其主要的优点是能大大缩短离心时间。而缺点在于, 它所能处理的血浆样本量较序贯超速离心法少得多。因此, 尽管此方法是脂蛋白分离的有效手段, 但不能作为制备大量脂蛋白样本的方法。然而当临床研究需要了解各类脂蛋白的组成情况时, 密度梯度超速离心因其快速而广泛采用。

    密度梯度离心方法是先将血浆的密度增高(直接加入固态NaBr或KBr), 并放入试管底部, 然后在其上面依次加入密度递减的溶液。用水平式转子超速离心时, 脂蛋白颗粒按密度梯度上浮分布。有两种密度梯法可供选用: 一种是连续梯度法; 另是一种是非连续梯度法。连续密度梯度超速离心时, 脂蛋白颗粒按其密度大小浮于其密度阶梯的特定部位。超速离心后, 用市售的梯度分镏器或在离心管底部钻孔将梯度溶液分馏并收集分馏液。这两种技术都要花费时间和精力, 因为这种梯度溶液易被搅混, 如当离心管从水平位回到垂直位时, 可引起脂蛋白分布的混乱。为克服梯度溶液分馏的困难; 现多采用非连续梯度离心法。

    1. 非连续密度梯度超速离心法