非连续密度梯度由分层加入的密度递减溶液组成。这可使不同密度的脂蛋白成分依次浮于梯度的上层而分离。在此介绍的方法(以Lidgren等的方法为基础)适用于Bechman SW40Ti甩平头与Beckman LM-8超速离心机。如用其他类型的转头和离心机时, 应重新计算适当的离心时间。用于SW40Ti转子的离心管有很多厂家生产。　当选择离心管时, 保证其"亲水性"致关重要。这样在离心管的内表面可形成均匀的液流以便于梯度形成。用Holmquist法(1982)进行聚乙烯醇涂层的非亲水性离心管也能形成这种均匀的液流。

    所需溶液: 需要两种密度的贮存液:

    a. d=1.006g/ml溶液: 22.4g NaCl; 0.2g EDTA和2ml 1M的NaOH溶于2升蒸馏水中。

    b. d=1.182g/ml 溶液: 在1升d=1.006g/ml的溶液中加入24g NaBr。

    然后将两种溶液接不同比例(见表6-2)混合即可配成6 种非连续性梯度溶液。

          表6-2. 非连续性密度梯度溶液制备

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溶液    密度(g/ml)  a液(1.006g/ml) b液(1.182g/ml)