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(b) 4%磷钨酸溶于0.19M氢氧化钠(NaOH)液中
步骤: (1) 在两份各0.5ml新鲜血清中分别加入50ul MgCl2(a)和50ul磷钨酸液(b)。
(2) 充分混匀并立即以2000g速度离心20分种。
(3) 取出上清液进行HDL-C测定, 在测定前上清液可冰冻保存。
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方案2. 用肝素/锰沉淀法进行HDL-C定量测定
试剂: (a) 2000u/ml肝素(冻干猪肠粘液肝素)
(b) 0.55M MnCl2(如用含依地酸二钠血浆时, 则需用1.1M MnCl2)
步骤: (1) 将0.5ml两份新配血清预冷到4℃,然后分别加入50ul肝素(a)和 50ul MnCl2液(b)。
(2) 充分混匀后放在4℃下静置45分钟。
(3) 在相同的温度下(4℃)以1600g速度离心30分钟, 取出上清液进行HDL-C测定, 测定前上清液可冷冻保存。
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用酶法测定经肝素/锰沉淀法所获的上清液中胆固醇时, 很重要的一步是应在反应混合液中加入依地酸二钠(EDTA), 以防止棕色沉淀产生, 否则将会造成HDL-C浓度人为的升高。 |