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蛋白质染色: 将凝胶放入含0.05%Coomassie蓝R-250的甲醇:醋酸:水(50:10:40体积比)混合液中进行染色, 然后在不同比例的甲醇:醋酸:水(20:9:7体积比)混合液中进行脱色处理, 直到底色变清。
脂质染色: 普通脂质染色的方法有多种, 但最常用的是红油-O法, 用含0.04%红油-O的60%甲醇液, 在55-60℃温度下进行凝胶染色至少24小时, 然后在5%醋酸中脱色。
e. 测定颗粒大小
凝胶可用含已知水合直径的蛋白质混合物(见表6-1)样本进行标准化, 混合物中每种蛋白质含量为2.5ug, 比较标准蛋白质和脂蛋白的移动距离, 即可计算出脂蛋白颗粒的直径。
表3-37-1. 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳的标准蛋白质直径
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蛋白质 水合直径(nm) 非水合直径(nm)
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甲状腺球蛋白 17.0 11.6 |