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脂蛋白分离和定量测定
来源:血脂网 编辑:FC   发布时间:2008-3-27 14:51:53

    蛋白质染色: 将凝胶放入含0.05%Coomassie蓝R-250的甲醇:醋酸:水(50:10:40体积比)混合液中进行染色, 然后在不同比例的甲醇:醋酸:水(20:9:7体积比)混合液中进行脱色处理, 直到底色变清。

    脂质染色: 普通脂质染色的方法有多种, 但最常用的是红油-O法, 用含0.04%红油-O的60%甲醇液, 在55-60℃温度下进行凝胶染色至少24小时, 然后在5%醋酸中脱色。

    e. 测定颗粒大小

    凝胶可用含已知水合直径的蛋白质混合物(见表6-1)样本进行标准化, 混合物中每种蛋白质含量为2.5ug, 比较标准蛋白质和脂蛋白的移动距离, 即可计算出脂蛋白颗粒的直径。

   表3-37-1. 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳的标准蛋白质直径

───────────────────────────

蛋白质               水合直径(nm)         非水合直径(nm)

───────────────────────────

甲状腺球蛋白    17.0                      11.6

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