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ii) 71.6g NaH2PO4·12H2O溶于蒸馏水, 加水至1 升。
51份i)液与49份ii)液混合, 使pH达6.8, 每升溶液加NaCl 29.2g。
(b). 0.01M Tris-HCl/0.15M NaCl/1mM EDTA/0.02%硫汞(pH7.4): 1.21gTris溶于蒸馏水, 用HCl调pH至7.4, 加8.77g NaCl, 0.37g Na2EDTA, 0.2g 硫柳汞, 加水至1升。
(c). 0.1M NaHCO3/0.5M NaCl/1mM EDTA(pH8.0): 8.40g NaHCO3溶于蒸馏水,pH调至8.0, 加29.2g NaCl和0.37g Na2EDTA, 加水至1 升。
(d). 0.5M 乙酸/0.5M NaCl/ 1mM EDTA(pH3.0): 29.2g NaCl, 0.37gNa2EDTA溶于0.5M 乙酸, 使其体积达1 升。
(e). 3M硫氰化钠: 24.3g NaSCN溶于蒸馏水, 终体积1升。
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方案7: 免疫亲合层析的一般方法
(1). Apo AI和Apo AII的特异单抗体在(a)液中按每毫升凝胶7-8mg免疫球蛋白的比例与葡聚糖凝胶4B交联。
(2). 免疫吸附剂在4℃(a)缓冲液中存放, 直到用时取出。
(3). 将1ml血浆与2ml免疫吸附剂在4℃下混合1小时, 所需免疫吸附剂的量由其结合能力决定, 这最好在预实验中测得。
(4). 将HDL-免疫吸附剂的混合物装入内径约1.5cm的硼硅酸盐柱。 |