(c). Coomassie蓝染色液: 0.01g Coomassie亮蓝R50 溶于甲醇:乙酸:水(5:1:4,V/V/V)混合液中, 将总体积用混合液加至1升。

      2. 样本制备

      测定总HDL时, 直接采用经密度1.21g/ml进行超速离心时所分离的样品, 不必透析处理。若要研究所分离HDL的亚类, 用(a)缓冲液透析样本(必要时在浓缩后), 并将4份样本溶液与1份含40%蔗糖的(a)缓冲溶液混合(以帮助样品沉积到凝胶表面)。HDL或其亚类样本可在4℃下存放24小时。

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      方案4: 电泳分离脂蛋白的方法

      (1). 将已充填凝胶的玻璃夹层装入电泳槽中。

      (2). 将样本梳水平位紧压置于凝胶顶部, 确保样本梳底部与凝胶之间没有空隙, 以防邻近加样孔之间样品扩散。但同时要注意, 不要撕坏或压碎凝胶。

      (3). 槽中加入适量的(a)缓冲液, 用加样器将缓冲液注入各孔, 并去除孔内的气泡。

      (4). 凝胶于70V预平衡20分钟。

      (5). 关上电源, 用自动加样器小心地在预制孔中加入10-20ul样品(含15-20ug蛋白), 其中两孔中加入相当体积的标准蛋白混合物, 以校准颗粒直径大小(如Pharmacia的HMW标准盒, 含甲状腺球蛋白、去铁蛋白、过氧化氢酶、乳酸脱氢酶及牛血清白蛋白)。