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      方案5: 肝素-葡聚糖凝胶的制备

      制备过程应在通风好和有防烟罩的房间中进行, 因为CNBr会释放有毒和有剌激性的氰化物浓烟。

      (1). 用蒸馏水将包装体积50ml的葡聚糖凝胶4B (Pharmacia/LKB)稀释至100ml。

      (2). 边搅拌边缓慢加入100ml(a)溶液(2M Na2CO3)。

      (3). 浆状物中一次性加入5ml冰冷的(b)溶液, 用力搅抖2分钟。

      (4). 将浆状物倒入多孔砂芯玻璃漏斗, 用1升(d)溶液洗涤, 然后用1升蒸馏水, 最后用1升(c)溶液冼涤, 真空过滤以形成湿结块。

      (5). 将此原料转入含100ml(e)溶液的塑料瓶内, 混匀后4℃下放置20小时。

      (6). 加入7.5g 甘氨酸以封闭所有非偶联的反应基团, 混匀在4℃下置放18小时。

      (7). 在粗砂芯玻璃滤器中, 用下列溶液各2升依次连续冲洗肝素-葡聚糖凝胶:(f)溶液、(g)溶液、(d)溶液、(h)溶液、(i)溶液。

      (8). 真空过滤以形成湿结块。将其移入密闭容器, 加入等体积(i)溶液, 终产物在4℃下至少保持6个月稳定不变。