1. 试剂

      (a). 3.0M Tris-HCl(pH8.9)(凝胶缓冲液):36.6g Tris溶于蒸馏水,用HCl调pH至8.9, 加水至终体积100ml。

      (b). 双丙烯酰胺: 30g丙烯酰胺和0.8g N,N-亚甲基丙烯酰胺溶于蒸馏水, 加至终体积100ml。

      (c). 过硫胺: 0.14g过硫胺溶于蒸馏水, 终体积100ml。

　 (d). 0.05M Tris-甘氨酸(pH8.3)(电泳缓冲液贮存液): 6.0g Tris, 28.8g甘胺酸溶于蒸馏水, 加水至终体积1升(注意:用前稀释10倍)。

      (e). 50mM Tris-甘胺酸/0.05%溴酚兰/1%蔗糖(pH8.3): 50mg溴酚兰, 1g蔗糖溶于100ml

已稀释10倍的电泳缓冲贮存液。

      (f). 凝胶混合物: 用前即刻将7.7g尿素快速溶于含2ml(a)液, 4ml(b)液, 2ml蒸馏水, 5ul TEMED和8ml(c)液的混合物中。

      2. 载脂蛋白的样本制备

      将载脂蛋白溶于(e)液(示踪染料), (e)液中已加入0.48g/ml尿素,这样配成每100ml含20-60ug蛋白的溶液。

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      方案12: 8M尿素电泳方法

      电泳一般使用市售药盒(如:Pharmacia/LKB,Biorad,Gibco), 一般程序如下:

      (1). 将适当数量的凝胶管(适宜大小为75mm x 5mm内径)底端封口, 垂直放置。