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(2). 将凝胶混合物((f)液)用移液管加入每凝胶管, 直至弯月面距管顶0.5cm,管中不能有气泡。
(3). 丙烯酰胺层上面加一层蒸馏水(约3mm高)以防止起初在胶面上形成曲折弯月面, 小心不要冲坏界面, 用移液管(吸管)慢慢沿管壁加水即可。
(4). 装好的各管在室温下静置约40分钟使凝胶发生聚集。灌胶的几分钟可观察到由于弥散作用丙烯酰胺混合物与蒸馏水之间的原始界面消失, 稍后出现新的界面, 此界面位于原始界面下1cm左右, 它代表聚合凝胶的顶部。
(5). 倒置凝胶管, 快速轻敲管壁倒出水层, 取下底部封口。
(6). 将管子放入电泳槽。
(7). 用蒸馏水将(d)液(电泳缓冲液贮存液)稀释10倍, 加入电泳槽中, 凝胶管顶部不能有气泡。
(8). 用自动吸管在每只凝胶管内轻轻将20ul载脂蛋白样本溶液加于丙烯酰胺凝胶之上。
(9). 每管施以2mA电流电泳, 直到示踪染料到达管底(大约90分钟)。
(10) 关断电源, 将管子自槽中取出, 用一带长细而钝针头(2.5寸, 23号)的注射器在凝胶表面与管壁之间喷水后, 再用橡皮吸头在玻璃管的一端轻轻加压,将丙烯酰胺凝胶柱从管中移出。假如要测RF值,应在示踪染料洗脱之前将一根短金属丝插到该部位。
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