(1). 两块玻璃板(通常为16x16cm和16x12cm)之间的两侧夹上间隔条, 封好, 底部加4%丙烯酰胺混合物(表6-6)到规定水平。

　 (2). 用10%丙烯酰胺(表6-6)充满两块玻板之间的空隙, 用蒸馏水覆盖, 置室温下使其聚合(约30分钟)。

      (3). 弃去水层, 在已凝结的凝胶顶部加4%丙烯酰胺混合物, 立即插入样本梳。静置使其聚合。如需要, 聚合的凝胶可用胶片包好, 置4℃过夜。

      (4). 将凝胶夹心片插入电泳槽, 槽内充满缓冲液(1体积贮存缓冲液加9体积蒸馏水)。   (5). 以自动加样器在每孔中加入200ul载脂蛋白样本。其中两孔中加入同样体积的标记蛋白,作为分子量的标准。较适合的这类混合物有"Electran", 分子量范围(12300-78000)(BDH)和低分子量范围(14000-97400)(Bio Rad)标准。

      (6). 以24mA恒流电泳, 直到示踪染料迁移到凝胶底部的数厘米范围内(约5小时)。   (7). 关闭电源, 将凝胶盒从电泳槽中移出, 小心将凝胶从玻上剥下。

      (8). 按上节介绍方法固定和染色凝胶。

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      (三)、在8M尿素中电泳

      在这种形式的电泳中, 载脂蛋白在凝胶中的迁移速度由净电荷和分子大小决定。它对分离不同Apo C蛋白特别有用。它比较适合在凝胶管中进行,也可在平板凝胶上进行。