血浆胆固醇和甘油三酯动力学的早期研究是采用标记前体[3H]甘油, [14C]脂肪酸)为基础。此标记前体将被结合到血浆类脂部分. 测定它们在血循环中的清除量可得到全身代谢率的初步原始资料。但当人们认识到血流中的类脂可与特异的蛋白结合(如类脂-蛋白复合物式脂蛋白),且在不同类脂蛋白之间此类特异蛋白可互相交换, 这种方法的局限性是显而易见的。因而最近大多数代谢研究都已采用外源性标记方法,该方法是将研究的脂蛋白或载脂蛋白分离并通常用碘作示踪标记。示踪剂然后被注入受试者体内, 定时抽取血样以了解其分解代谢情况。血浆中与特异脂蛋白成份结合的蛋白的放射活性消失速度可用来估计蛋白的分解代谢速率(FCR), 表示方式为"分解代谢池/每日"。血浆池测定本身(mg为单位)可用来计算蛋白的绝对分解代谢率(mg/日为单位), 它通常以每公斤体重表示。在稳态条件下,分解代谢率与脂蛋白中载脂蛋白的合成速度相等。在早期研究中, 此方法首次用于脂蛋白分析,但大多数目前的工作是首次分离出特定的脂蛋白类(LDL)并测定其蛋白成份(Apo B)的合成及分解代谢率。
外源性标记技术的正确性是基于以下假设:
(a)标记过程不改变所研究脂蛋白的结构, 也就是说示踪物与被示踪物为等量代谢。
(b)示踪物具有结构及代谢的同源性。
(c)分解代谢发生在或接近于血浆池内, 还可发生在与血浆快速平衡的池内。 |