葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质，此有色物质在625nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过测定蓝色物质的吸光度可计算样品中葡萄糖的含量。葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ， GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶 (peroxidase ， POD) 在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体 4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即 Trinder 反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。

葡萄糖氧化酶法测定血糖注意事项

    （1）GOD高特异性催化β-D-葡萄糖，而血清中葡萄糖α和β构型各占36%和64%，要使葡萄糖完全反应，必须使α-葡萄糖变旋为β构型。（解决方法：在试剂中含有变旋酶加速变旋过程或延长孵育时间）

    （2）过氧化物酶的特异性远低于GOD，尿酸、维生素C、胆红素、血红蛋白、四环素等可与H2O2竞争色原受体，从而抑制呈色反应，使血糖测定值偏低。